高品推介∣加尾法miRNA qRT-PCR试剂盒与上游引物库

基于qPCR 检测技术的miRNA表达及差异分析是对测序、芯片结果的有效补充与验证，是进一步确定研究对象并做后续功能研究或生物标志物筛选的基础。英赞拥有自主开发的加尾法检测试剂盒（Cat# T427）及其优化筛选好的上游引物库（Cat# T432、T433），为开展miRNA研究的广大科研工作者提供了极大的便利。

MicroRNA (miRNA)是一类长度为19-23nt的内源性非编码单链小分子RNA，是一种重要的基因表达调控因子。本试剂盒（Cat# T427）采用在miRNA 3’末端加多聚A尾Poly(A)，再使用Oligo(dT)-universal tag通用逆转录引物进行逆转录反应，生成miRNA对应的cDNA第一链，最后采用miRNA的特异性正向引物和通用反向引物进行特异性的miRNA qPCR检测。该试剂盒能够从单一样品中快速、准确地定量检测miRNA，具有高通量，高灵敏度，高特异性等优点。

1. 高灵敏度

将has-mir-144-3P miRNA标准品进行10倍梯度稀释，从1μM 至10pM共6个梯度，使用FQ^TM miRNA Poly(A) qRT-PCR SYBR Kit（Cat# T427）对其进行定量检测 ，并以从A公司购买的同类产品作为对照，结果表明相对于同类产品FQ^TM miRNA Poly(A) qRT-PCR SYBR Kit （Cat# T427）具有更低的检测限及更高的灵敏度。

      2. 高特异性及高通量

以1μg X293 Total RNA 为模板，进行加多聚A尾再进行逆转录，将逆转录反应液稀释5倍作为模板，同时检测12种miRNA，每孔添加5μL。结果表明FQ^TM miRNA Poly(A) qRT-PCR SYBR Kit （Cat# T427）可同时检测多种miRNA，且均具有较好的检测特异性，结果可信度高。