全新升级 | 快速、高灵敏的染料法qPCR试剂

2025-08-07

产品简介


EnzyValley EVNext® Universal SYBR qPCR Mix是一款基于 SYBR染料、用于 qPCR 和 两步法 RT-qPCR的高性能预混液。

该预混液包含一种经分子改造的热启动DNA聚合酶和定向优化的PCR 缓冲液,在60℃下能够严格封闭DNA聚合酶活性,非常适合定量检测基因组、质粒、病毒和 cDNA 模板,具有高度的可重复性、灵敏度和特异性。

该预混液含有特殊的 ROX 被动参比染料(Passive Reference Dye),适用于各种qPCR仪器,无需在不同仪器上调整ROX的浓度。

此外,该产品还有dUTP/UDG防污染系统版预混液(EVNext® Universal SYBR qPCR Mix U+)可供选择,更好地解决气溶胶污染问题,保证结果的准确性。





产品特点


01

扩增特异性高

热启动形式的DNA聚合酶可有效避免产生引物二聚体和非特异性扩增。

02

宽线性范围

准确定量靶标浓度横跨8个数量级的样本。

03

数据稳定性高

反应体系配制后室温放置48 h仍具有优异的扩增性能,即使在较长操作时间下也可获得稳定的测试结果。

04

荧光信号高

扩增曲线、熔解曲线线型更好,信噪比更高。

05

兼容复杂模板

对一定降解程度的样本以及高GC含量、结构复杂的靶标可以实现稳定扩增,得到理想结果。

06

广泛的平台适用性

预混通用参比染料,无需额外添加用于校正孔间荧光信号的参比染料。

07

程序兼容性强

兼容各种qPCR仪器,可根据仪器型号选择标准程序或快速程序定量。

应   用

  • 基因表达差异分析

  • 绝对定量分析

  • siRNA验证

  • 病原体检测

  • 基因分型




支持数据

EVNext® Universal SYBR qPCR Mix

01

复杂样品的扩增效率和特异性

使用EVNext® Universal SYBR qPCR Mix开展复杂样本的qPCR定量分析,获得了更高的扩增效率和特异性。


图1 . EVNext® Universal SYBR qPCR Mix扩增复杂样本效果更好


使用不同品牌的染料法qPCR预混液,从小鼠粪便基因组DNA中分别扩增4种肠道微生物AKK、BAC、CLO、LAC对应的靶标基因。



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02

低丰度基因检出

使用EVNext® Universal SYBR qPCR Mix 定量检测多个低丰度表达基因(Ct 值30-35)时,扩增效率更高且目标产物峰单一。


图2 . EVNext® Universal SYBR qPCR Mix 扩增低丰度基因效率高,且不产生引物二聚体


使用不同品牌的染料法qPCR预混液,分别扩增293T细胞cDNA的4个低丰度表达基因。


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03

扩增高GC含量基因的特异性

EVNext® Universal SYBR qPCR Mix 扩增高GC含量基因时,扩增曲线线型优美,且熔解曲线峰单一,具有优良的特异性。


图3 . EVNext® Universal SYBR qPCR Mix 扩增高GC含量基因特异性更好


使用不同品牌的染料法qPCR预混液,分别扩增GC含量为70%、75%、80%的三个靶标基因。



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04

定量的线性范围

使用EVNext® Universal SYBR qPCR Mix 在宽广的线性范围内得到的扩增效率符合MIQE (Minimum Information for Publication of Quantitative Real-Time PCR Experiments) 指南要求范围(90-110%),扩增曲线平台期荧光值稳定,产物特异性高。


图4 . EVNext® Universal SYBR qPCR Mix 进行绝对定量分析时定量范围宽广且准确度高


将U6质粒标准品(108 copies/μL)进行连续 7个10倍梯度的稀释,使用EVNext® Universal SYBR qPCR Mix扩增U6基因。



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05

防污染能力

EVNext® Universal SYBR qPCR Mix U+可在室温下高效清除体系中存在的气溶胶污染物,有效保证检测结果的准确度。


图5 . EVNext® Universal SYBR qPCR Mix U+具有高效的防污染能力


使用EVNext® Universal SYBR qPCR Mix U+分别扩增10000个拷贝的dUTP替代dTTP的DNA模板和正常的DNA模板。


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06

耐受不同来源PCR抑制剂的性能

深度优化的PCR缓冲液配方,使得EVNext® Universal SYBR qPCR Mix 对来自植物(如木聚糖)、土壤(如腐殖酸)和粪便(如胆酸盐)的抑制剂表现出较强的耐受性。


图6 . EVNext® Universal SYBR qPCR Mix 的扩增性能不易受各类抑制剂的影响


以 HeLa 细胞 cDNA 为模板扩增U6基因。反应体系中包含:1-无抑制剂;2-腐殖酸(0.5 μg/mL);3-胆酸盐(10 mM);4-木聚糖(250 μg/mL)。



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07

结果重复性

EVNext® Universal SYBR qPCR Mix具有严谨的热启动酶活封闭效果,使得扩增结果非常稳定,即使将配制好的反应体系室温放置48 h后Ct 值波动仍然很小,且平台期荧光值稳定。


图7. EVNext® Universal SYBR qPCR Mix 的多复孔检测结果高度一致,且反应液在室温长时间放置后依然稳定


以 HeLa 细胞 cDNA 为模板,检测GAPDH基因的表达,在配制96管反应液后,分别进行两组处理:1-配制后立即取48管上机;2-配制后室温放置48 h后取剩余48管上机。



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08

储存稳定性

EVNext® Universal SYBR qPCR Mix的酶活稳定性高,经不同条件储存或处理后扩增结果基本不受影响,扩增性能与-20℃存放的对照组相比无明显差别。


图8 . EVNext® Universal SYBR qPCR Mix 在不同温度下储存或反复冻融处理后酶活稳定性高


以-20℃储存预混液为对照,使用4℃存放1个月、37℃放置7天或反复冻融20次的 EVNext® Universal SYBR qPCR Mix , 扩增HeLa 细胞 cDNA 样本中的HPRT基因。


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试用申请

EnzyValley

试用规则|

试用装EVNext® Universal SYBR qPCR Mix(S055S),每个课题组限申请试用装1份,数量有限,送完即止,感谢您的理解与支持;仅限中国区终端用户申请。


申请方式|

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申请后请保持电话畅通,工作人员会跟您联系确认是否申请到试用装,并确认发货事宜。


必须提供试用报告。




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